Lucilia sericata'nın lucymycin geninin moleküler karakterizasyonu
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Erciyes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, TIBBİ PARAZİTOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2017
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: SONGÜL ÇETİN
Danışman: Zuhal Önder
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:İyileşmeyen kronik yaralar bütün dünyada önemli bir sağlık sorunudur. Bu yaralara uygulanan en eski tedavi yöntemi olan Maggot Debridman Tedavi (MDT) günümüzde de başarılı uygulama etkinliği ile dikkat çekmektedir. MDT, Lucilia sericata sinek larvalarının steril hale getirilerek iyileşmeyen yaraların tedavisinde kullanılmasına verilen isimdir. Bu çalışma, Lucilia sericata larvalarının lucimycin geninin moleküler karakterizasyonunu belirlemek amacıyla yapılmıştır. Bu amaçla, Anabilim dalımız insektaryum ünitesinde ergin sineklerden elde ettiğimiz 3. dönem larvalardan RNA izolasyonu yapılmış ve takiben revers transkripsiyon ile cDNA sentezi gerçekleştirilmiştir. Sentezlenen cDNA'lar, L. sericata'nın lucimycin geni için dizayn edilen spesifik primerler ile PCR analizine tabii tutulmuş ve elde edilen amplikonlar pJET1.2/blunt vektörüne klonlanmış ve plazmit pürifikasyonu yapılmıştır. Elde edilen rekombinant plazmitler vektör spesifik primerlerle sekans analizine tabii tutulmuş ve hedef gen bölgesi dizilimleri elde edilmiştir. Nükleotid dizileri saptanan izolatın moleküler karakterizasyonu belirlendikten sonra GenBank'a kaydedilmiş (MF964229) ve Dünya'da yalnızca Almanya'dan bildirilmiş (GenBank Aksesyon no: KJ413251.1) Lucimycin izolatı ile ikili hizalaması yapılmıştır. Nükleotit dizilimlerinin ikili hizalama sonucunda ilgili iki izolatın birbiri ile %99 identik oldukları saptanmış ve elde edilen bu oranın, nükleotid sekans dizilimlerinin 113. nükleotidlerindeki mutasyondan ileri geldiği tespit edilmiştir. Sonuç olarak bu çalışma ile Türkiye'de ilk kez L. sericata larvalarından elde edilen lucimycin geninin moleküler karakterizasyonu yapılmış ve elde edilen izolat Türkiye'nin biyolojik varlığı olarak GenBank'a kaydı sağlanmıştır. Anahtar kelimeler: Lucilia sericata, lucimycin, moleküler karakterizasyon