İki farklı genin (Güçlendirilmiş yeşil floresan protein geni, insan gamma interferon geni) ayrı ayrı veya birlikte mikroenjeksiyonunun transgenik fare eldesi üzerine etkilerinin araştırılması
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Erciyes Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bil., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2009
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: KORHAN ARSLAN
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Munis Dündar
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Sunulan çalışmada hIFN-? ve EGFP gen konstraktlarının farklı konsantrasyonları birlikte ve ayrı ayrı pronüklear safhadaki fare embriyolarına mikroenjekte edilmiştir. Mikroenjeksiyon deneyleri aktarılan gen konstraktlarının yalnız ve/veya birlikte aktarımlarına göre üç farklı deney grubu olarak sınıflandırılmıştır. I.Deney Grubunda hIFN-? ve EGFP genleri birlikte mikroenjekte edilmiş, toplam 759 mikroenjekte embriyo taşıyıcı annelere aktarılmıştır. Aktarımlar sonucunda toplam 39 yavru doğmuştur. Yapılan moleküler analizlerde toplam 3 yavrunun transgenik olduğu belirlenmiştir. Üç transgenik yavrudan 2'si EGFP transgenik, 1 tanesi ise hIFN-? transgenik dir. II.Deney Grubunda yalnız hIFN-? geni mikroenjekte edilmiş, toplam 518 mikroenjekte embriyo taşıyıcı annelere aktarılmıştır. Aktarımlar sonucunda toplam 21 yavru doğmuştur. Yapılan moleküler analizlerde toplam 2 yavrunun hIFN-? transgenik olduğu belirlenmiştir. III.Deney Grubunda yalnız EGFP geni mikroenjekte edilmiş, toplam 431 mikroenjekte embriyo taşıyıcı annelere aktarılmıştır. Aktarımlar sonucunda toplam 5 yavru doğmuştur. Bu yavrulardan elde edilen DNA'lar ile yapılan moleküler analizlerde transgenik yavruya rastlanmamıştır. Yapılan istatistiki değerlendirmede transgenlerin bir arada ya da ayrı ayrı mikroenjeksiyonlarının transgenik yavru eldesi üzerine anlamlı bir etkisinin olmadığı ortaya konmuştur ( p>0.05).Sunulan çalışmada elde edilen sonuçlar ile iki farklı genin birlikte mikroenjeksiyonu sonunda doğan yavruların transgenik yüzdelerinin yüksek olduğu ortaya konmuştur. Sunulan çalışmada geliştirilen protokolün transgenik fare üretim çalışmalarında uygulanması durumunda iki farklı geni ayrı ayrı veya birlikte taşıyan transgenik fare hatları elde edilebilecek, böylece ekonomi ve zaman açısından tasarruf sağlanabilecektir.Anahtar kelimeler: Transgen, mikroenjeksiyon, EGFP, hIFN-?, Ko-enjeksiyon