Investigating the expression of immune genes in response to lipopolysaccharide (LPS) and lipoteichoic acid (LTA) stimulation in sheep lungs
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Erciyes Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, --, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: AHMED QASIM NAJI NAJI
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Mehmet Ulaş Çinar
Eş Danışman: Md. Mahmodul Hasan Sohel
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:KOYUN AKCİĞERLERİNDE LİPOPOLİSAKKARİT (LPS) VE LİPOTEİKOİK ASİT (LTA) STİMÜLASYONLARI İLE OLUŞAN İMMUN YANITIN GEN İFADELERİNİN ARAŞTIRILMASI Ahmed Qasim NAJI Erciyes Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü Doktora Tezi, Haziran 2019 Tez Danışmanı: Doç. Dr. Mehmet Ulaş ÇINAR İkinci Danışman: Dr. Öğr. Üyesi Md Mahmodul Hasan SOHEL ÖZET Koyun, dünyanın her köşesinde et, süt ve yün ürünleri sağlayan, ekonomik açıdan en önemli evcil hayvanlardan biridir. Bu çalışma in vitro ve in vitro olmak üzere iki aşamada gerçekleştirildi. In vitro çalışma için, alveolar makrofajlar (AM'ler) koyun akciğerlerinden izole edildikten sonra saflaştırıldı ve 4 saat ve 24 saat süreyle 10µg/ml LPS, 10µg/ml LTA ve 10µg/ml LPS + 10µg/ml LTA ve kontrol kombinasyonu ile inkübe edildi. Dördüncü saatte alınan örneklerde TLR2, TLR4, NF-ĸB, TNFα, IL-1β, IL-6, IL-10, ve IL-8 genlerinin ekspresyonlarının 24. saateki örneklere göre daha fazla olduğu bulunmuştur. Ayrıca, NF-ĸB, TNFa, IL-1β, IL-6, IL-8 ve IL-10'un mRNA ifadelerinde LPS, LTA ve LPS + LTA kombinasyonuna verilen immune yanıtta 4. ve 24. saatler arasında önemli istatistiki yanıt olduğu bulunmuştur. In vivo çalışma iki farklı koyun ırkından (Akkaraman ve Romanov) toplamda 24 sağlıklı kuzu üzerinde gerçekleştirilmiş ve bu kuzular 20µg/kg LPS, 50µg/ml LTA ve 20µg/kg LPS+ 50µg/ml LTA kombinasyonuna 24 saat boyunca maruz bırakılmışlardır. Her iki ırktaki hayvanlar 4 farklı uygulama grubuna (kontrol, LPS, LTA ve LPS+LTA kombinasyonu) bölünmüşlerdir. Hayvanlar 24. saatte ötanazi edilmiş, akciğerleri alınmış ve alveolar makrofajlar izole edilmiş ve saflaştırılmıştır. Daha sonra, total RNA izolasyonu, cDNA sentezi ve Real-Time PCR ile aynı genler için ekspresyon seviyeleri ölçülmüş ve kontrol grubu ve birbirleri arasındaki gen ekspresyonları karşılaştırılmıştır. Romanov kuzularda Akkaramanlar'a göre TLR2, TLR4, NF-ĸB, TNFα, IL-1β, IL-6, IL-8, ve IL-10 genlerinin ekspresyonlarının daha yüksek olduğu görülmüştür. Genel olarak, elde edilen sonuçlar koyunlarda solunum yolu hastalıklarına karşı seçimin etkinliğini artıracaktır. Anahtar Kelimeler: Akciğer inflamasyonu, In vitro, In vivo, Bağışıklık, Sitokin, Alveolar makrofajlar, Lipopolisakkarit (LPS), Lipoteikoik asit (LTA)