A1 tip inek sütü ve süt ürünlerinde Beta-kazomorfin-7 için HPLC' ye dayalı tayin yöntemi geliştirilmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Erciyes Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, -, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2012

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: AYSEL ERASLAN

Danışman: Ebru Saatçi

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada A1 tip inek sütü ve süt ürünlerinde bulunan beta-kazomorfin-7 (ß-kazomorfin-7, BKM-7) peptiti HPLC' de analiz edilmiştir. Bunun için öncelikle BKM-7 aminoasit sekansına sahip olan standartların 220 nm dalga boyunda maksimum absorbans verdiği belirlendikten sonra alıkonma zamanları tayin edilmiştir. BKM-7' nin 36-38. dk arasında pik verdiği gözlenmiştir. Elde edilen BKM-7 piklerinin konsantrasyonu, 0.0312-1.25 mM derişim aralığında bir seri standart BKM-7 eğrisine karşı hesaplanmıştır. Enzimatik kesim sonrası süt örneklerinde BKM-7 piki görülmemiştir. Filtre edilen yoğurt örneklerinde de BKM-7 piki görülmemiştir. 10000 ve 30000 MWCO ile filtre edilen peynir örnekleri de HPLC' ye yüklenmiştir. K ve L marka peynirlerde BKM-7 piki görülmemiştir. 10000 MWCO ile filtre edilen M marka peynirde alanı 0.043 ve 0.046 olan BKM-7 pikleri görülmüştür. Bu alanlara karşılık gelen konsantrasyonlar BKM-7 standart kalibrasyon eğrisi kullanılarak sırasıyla 5.3 ve 5.7 ?M olarak hesaplanmıştır. 30000 MWCO ile filtre edilen M marka peynirde ise alanı 0.076 ve 0.1 olan BKM-7 pikleri görülmüştür. Bu alanlara karşılık gelen konsantrasyonlar BKM-7 standart kalibrasyon eğrisi kullanılarak sırasıyla 9.4 ve 12.3 ?M olarak hesaplanmıştır. 10000 MWCO ile filtre edilen N marka peynirde alanı 0.11 ve 0.17 olan BKM-7 pikleri görülmüştür ve alanlara karşılık gelen konsantrasyonlar sırasıyla 13.6 ve 21 ?M olarak hesaplanmıştır. 30000 MWCO ile filtre edilen N marka peynirde ise alanı 0.23 ve 0.27 olan BKM-7 pikleri görülmüştür ve alanlara karşılık gelen konsantrasyonlar sırasıyla 28.4 ve 33.3 ?M olarak hesaplanmıştır. Kullanılan filtrelerin geri kazanım katsayılarına göre (10000 MWCO için 0.6 ve 30000 yapılan MWCO için 0.9) yapılan iyileştirme ile M marka peynir suyundaki ortalama BKM-7 miktarı 10.61 ± 2.04 ?M ve N marka peynir suyundaki ise 31.56± 3.85 ?M olarak bulunmuştur.Bu çalışma, sağlık açısından her yönden önem ihtiva eden biyoaktif bir peptit olan BKM-7' nin tespiti ve buna bağlı olarak A1 tip sütün tespitine olanak sağlayan, Türkiye' deki bu konu ile ilgili taramayı gerçekleştiren özel bir çalışma niteliği taşımaktadır. Ayrıca BKM-7' nin miktar tayini yapılabilmesi ile de sütte A1 tip süt biyobelirteci olarak analitik yönden günlük hayata uygulanabilirliği kuvvetli ve özgüldür.Anahtar Kelimeler: A1 tip inek sütü, beta-kazomorfin-7, ters-faz HPLC