Akademik Veri Yönetim Sistemi
30. Uluslararası Türk Pedodonti Derneği Kongresi, Antalya, Türkiye, 17 - 20 Ekim 2024, ss.146
AMAÇ: Diş çürüğü gelişiminde varlığı kanıtlanan katepsin B enziminin, diş hekimliğinde sıklıkla kullanılan sodyum hipoklorit (NaOCl) ve etilen diamin tetra asetik asit (EDTA) ile inhibisyonunun; ultraviyole-görünür ışık (UV-Vis) spektrofotometre ile incelenmesi amaçlanmıştır.
YÖNTEM: Katepsin B ve substratı olan Z-Arg-Arg-pNA farklı sıcaklıklardaki ortam koşullarında reaksiyon için bırakılmıştır. Enzimin aktive olup olmadığı bu reaksiyon sonucunda oluşması beklenen p-nitroanilinin, UV-Vis spektrofotometre ile göstereceği absorbans değerinin kontrolü ile sağlanmıştır. Enzimin ideal çalışma şartları sağlandıktan sonra %5’lik NaOCl ve %17’lik EDTA ortama sırasıyla 10, 20, 40, 80 ve 160 μL olmak üzere ayrı ayrı eklenmiştir. Her deney tüpü 30 dakika boyunca 37 ̊C’de inkübe edilmiştir ve sonrasında UV-Vis spektrofotometre ile p-nitroanilin oluşumu incelenmiştir. Elde edilen grafikler birbiriyle kıyaslanmıştır.
BULGULAR: Solüsyon eklenen deney tüplerinde gözlemlenen absorbans değerleri, normal şartlar altında gerçekleşen katepsin B ve Z-Arg-Arg-pNA reaksiyonundaki absorbans değeri ile karşılaştırılmıştır. NaOCl eklenen deney tüplerinde NaOCl miktarının artmasıyla p-nitroaniline ait olan absorbans değerinin düştüğü gözlenmiştir. EDTA eklenen deney tüplerinde ise tam tersi ortama eklenen EDTA miktarının artmasıyla absorbans değerinin yükseldiği ve enzimin aktivasyonunda artışa neden olduğu görülmüştür.
SONUÇLAR: Çalışmanın sonucunda NaOCl’nin katepsin B enzim aktivitesini inhibe ettiği gözlemlenmiştir. EDTA’nın ise ortama eklendikçe enzim aktivitesini arttırdığı bulunmuştur. Bu bilgiler ışında çürüğün ilerlemesinin durdurulması, aktif çürük lezyonlarının durmuş çürük lezyonlarına dönüştürülmesi açısından NaOCl önemli ajan olma özelliğini, katepsin B enzim metabolizmasının inaktivasyonu ile sağlayabilmektedir.
OBJECTIVE: The aim of study was to demonstrate the inhibition of cathepsin B enzyme, which is known to be involved in the development of dental caries, by commonly used dental materials sodium hypochlorite (NaOCl) and ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), using ultraviolet-visible spectrophotometry (UV-Vis).
METHOD: Cathepsin B and its substrate Z-Arg-Arg-pNA were incubated under different temperature conditions to initiate the reaction. Activation of the enzyme was confirmed by measuring the absorbance of p-nitroaniline, expected to form as a result of this reaction,using UV-Vis spectroscopy. Once optimal conditions for enzyme activity were established, NaOCl (5%) and EDTA (17%) were separately added in volumes of 10,20,40,80 and 160 μL to the reaction environment.Each experimental tube was then incubated at 37°C for 30 minutes, followed by analysis of p-nitroaniline formation using UV-Vis spectroscopy.The resulting graphs were compared with each other.
RESULTS: The absorbance values observed in tubes with added solutions were compared to the absorbance under normal conditions of the cathepsin B and Z-Arg-Arg-pNA reaction.It was observed that as the amount of NaOCl increased in the experimental tubes,the absorbance of p-nitroaniline decreased.Conversely, in tubes with added EDTA,an increase in absorbance was observed with increasing EDTA concentration,indicating enhanced enzyme activation.
CONCLUSIONS: Study concluded that NaOCl inhibits the activity of cathepsin B enzyme,whereas EDTA enhances enzyme activity with increasing concentration.Based on these findings, NaOCl could potentially serve as an important agent with inhibition of cathepsin B enzyme metabolizm; halting the progression of caries and converting active lesions into arrested lesions.