DİKKAT EKSİKLİĞİ VE HİPERAKTİVİTE BOZUKLUĞU OLAN ÇOCUK HASTALARDA ADAY GENLERİN EKSPRESYONLARININ ARAŞTIRILMASI


Öğr. Gör. Dr. HİLAL AKALIN

Tez Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Erciyes Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bil., Türkiye

Tez Danışmanı: Prof.Dr.Yusuf Özkul

Tezin Onay Tarihi: 2017

Tezin Dili: Türkçe

Desteklendiği Program: San-Tez Programı

Özet:

Dikkat Eksikliği ve Hiperaktivite Bozukluğu (DEHB); özellikle çocuklarda ve ergenlik çağındaki bireylerde yaygın olarak gözlenen, patofizyolojisinde genetik ve çevresel nedenlerin etkili olduğu heterojen bir hastalıktır. Bu tezde; literatür taraması ile hastalıkla ilişkisi olduğu düşünülen 11 aday gen (SLC6A3, SLC6A4, SLC1A2, VMAT2, MAOA, COMT, GLYAT, GRM5, DRD4, TPH1 ve ADRA2C )’in tedavi öncesi ve sonrası ekspresyon analizleri yapılarak, tedavide sık kullanılan Metilfenidat ve Atomoksetin ilaçlarının, etkinliklerinin belirlenmesi ve ayrıca tedavide kullanılan ilaçların metabolizmasından sorumlu olan CYP2D6 geninin varyant analizlerinin çalışılması amaçlanmıştır. Çalışmaya; 43 DEHB tanısı konmuş çocuk hasta ile benzer yaştaki 38 sağlıklı çocuk dahil edilmiştir. Hasta grubu; 35‘i metilfenidat, 8’i atomoksetin kullananlar olarak 2’ye ayrılmıştır. Metilfenidat kullananlar tedavi öncesi (MTÖ) / sonrası (MTS), atomoksetin kullananlar tedavi öncesi (ATÖ) / sonrası (ATS) ve kontrol grubuyla (KG) birlikte, 5 ana çalışma grubu oluşturulmuştur. Çalışma gruplarındaki her bireyden EDTA’lı tüplere 10 ml kan alınmıştır. DNA ve RNA izolasyonları yapılmıştır. Belirlenen genlerin mRNA ekspresyon seviyeleri, revers transkripsiyon–kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu (RT-qPCR) yöntemi ile gösterilmiştir. CYP2D6 genindeki 5 farklı (CYP2D6*3, CYP2D6*4, CYP2D6*5, CYP2D6*6 ve CYP2D6*10 ) allelin, hastalık ve tedavi süreçleri üzerindeki etkisinin araştırılması için pirosekanslama yöntemi ile mutasyon analizi yapılmıştır. Sonuç olarak, hasta bireylerde SLC6A3 (DAT) geni ekspresyon seviyesi, kontrol grubuna göre anlamlı oranda yüksek tespit edilirken (t- testi, p≤0.01), SLC6A4, SLC1A2, VMAT2, MAOA, COMT, GLYAT ve TPH1 genlerinin mRNA ekspresyon seviyeleri kontrol grubuna göre anlamlı oranda düşük tespit edilmiştir (t- testi, p≤0.01). Böylece aday genlerin ekspresyon farklılıklarının DEHB tanısında biyobelirteç olarak kullanılabilirliği tespit edilmiştir. Ayrıca CYP2D6 geni varyant analiz sonuçları ile aday genlerin mRNA ekspresyon seviyeleri ve hastaların Klinik Global izlenim skorları arasında Pearson korelasyon analizi yapılmış istatistiksel olarak herhangi bir ilişki bulunamamıştır. ( p>0.05). Bu genin hastalıkla ve hastalığın tedavisiyle ilişkisinin tam anlamıyla ortaya konulabilmesi için daha fazla hasta sayısı ve farklı gruplarla yapılacak çalışmalara ihtiyaç duyulmaktadır.