Sumak Kimyon ve Kekik Ekstrelerinin Hepatoselüler Karsinoma Hücre Hattında Apoptoz ve Paraptoza Etkisi


ÇİÇEK B. (Yürütücü), LEKESİZCAN A., YAŞAR FIRAT Y.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2021 - 2023

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Başlama Tarihi: Nisan 2021
  • Bitiş Tarihi: Ağustos 2023

Proje Özeti

Bu çalışma sumak, kimyon ve kekik ekstrelerinin hepatoselüler karsinoma (HCC) hücre hattında apoptoz ve paraptoza etkisini değerlendirmek amacıyla planlanmıştır. Çalışmada heptaoselüler karsinoma hücre hattı olan HepG2 hücre hattı kullanılacaktır. Ayrıca HepG2 hücre hattına benzer epitelyal özellikteki  embriyonel böbrek hücre hattı HEK-293 verilerin karşılaştırılması amacıyla kullanılacaktır. Hazırlanan sumak, kimyon ve kekik ekstrelerinin tek tek ve sinerjistik olarak HepG2 ve HEK-293 hücrelerinde sitotoksik değerleri incelenecek ve bulgular doğrultusunda hücrelere verilecek olan ekstrelerin miktarları tayin edilecektir. Ekstrelerin tek tek ve sinerjistik olarak HepG2 ve HEK-293 hücre hatlarında apoptoza etkisini belirlemek için Annexin-V FITCH/PI çift boyama analizi yapılacaktır. Western Blot tekniği ile apoptozda görevli olan Kaspaz-3,-7,-9, Bax ve Bcl-2 proteinlerinin ekspresyonları değerlendirilecektir. Ekstrelerin paraptoza etkisini belirlemek için ise immünohistokimyasal boyamalarla Bip ve CHOP proteinlerinin ekspresyon yoğunlukları değerlendirilerek endoplazmik retikulumda meydana gelen değişiklikler gösterilecektir. Bunlara ek olarak hücrelerde üretilen ROS miktarı ölçülecek ve ELİSA kitleri ile SOD, TAS, TOS değerleri ölçülerek toplam antioksidan ve oksidan seviyeleri belirlenecektir. Elde edilen veriler HepG2 ve HEK-293 hücre hatlarında karşılaştırılacaktır. Yapılan literatür taramasına göre sumak ekstresinin HepG2 hücrelerinde apoptoza etkisinin inceleyen çalışma bulunmamaktadır. Kekik ve kimyon ekstrelerinin de HepG2 hücrelerinde sitotoksik aktiviteleri değerlendirilmiş, ancak apoptoza etkisi araştırılmamıştır. Yine bu üç baharatın HepG2 hücrelerinde apoptoza sinerjistik etkileri incelenmemiştir. Ayrıca bu üç baharatın tek tek ve sinerjistik olarak da HepG2 hücrelerinde paraptoza etkisi daha önce çalışılmamıştır. Yapılması planlanan çalışmada sumak, kekik ve kimyon ekstrelerinin apoptoz ve paraptoz üzerine etkisi HepG2 hepatosellüler karsinoma hücre hattında araştırılacak ve bu ekstrelerin üçünün birlikte verilmesi ile ayrı ayrı verilmelerinin apopitotik ve paraptotik yolaklara etkisi karşılaştırılarak antikanser özellikleri değerlendirilecektir.